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黄金城官网线路在核酸的定量上也起著重要作用

作者:黄金城官网网址仪器 -- 行业领导者

  黄金城官网线路是指,使單色儀或特殊光源供給的特定波長的單色光通過標准試樣和被分析試樣,比較兩者的光強度分析物質成分的分光器。已經成爲現代分子生物實驗室的常規儀器。
  核酸的定量是黄金城官网线路使用频率比较高的功能。可以对可溶于缓冲液中的寡核苷酸、单链、双链DNA和RNA进行定量。核酸最高吸收峰的吸收波长为260nm。由于每个核酸的分子结构不同,因此其换算系数不同。要对不同类型的核酸进行定量,需要预先选择对应的系数。测试后的吸光值经过上述系数的换算,得到了相应的样品浓度。测试前,选择正确的步骤,输入原液和稀释液的体积,然后测试空白液和样品液。但是,实验并不顺利。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的机器,吸光值的漂移越大。
  事实上,黄金城官网线路的设计原理和工作原理允许吸光值在一定范围内变化。也就是说,仪器有一定的精度和精度。另外,还需要考虑核酸本身的化学性质和溶解核酸的缓冲液的pH、离子浓度等。测试时离子浓度过高时,读取值有时会漂移,因此推荐使用像TE这样pH值恒定、离子浓度低的缓冲液。
  樣品的稀釋濃度也是不可忽視的因素:因爲樣品中不可避免地存在細小的粒子,特別是核酸樣品。這些小粒子的存在會幹擾測試效果。爲了將粒子對檢查結果的影響控制在最小限度,核酸的吸光值優選至少大于0.1A,吸光值優選爲0.1-1.5A。在這個範圍內,粒子的幹擾比較小,結果穩定。因此,這意味著樣品的濃度不能過低或過高(超出光度計的測試範圍)。
  最後是操作要素。如果混合不充分,吸光值太低,會出現負值。混合液中不能存在氣泡。空白液中沒有懸浮物。否則,讀數漂移會很劇烈;必須使用相同的比色杯測試空白液和樣品。不這樣做的話,濃度差異太大了;換算系數和樣品濃度單位的選擇一致;窗戶磨損的彩杯不能采用;樣品的體積必須達到彩杯所要求的最小體積等,有很多操作事項。
  除了核酸浓度,黄金城官网线路还同时给出了一些非常重要的比值,代表了样品的纯度。例如,A260/A280之比因为蛋白的吸收峰为280nm,所以用于评价样品的纯度。纯样本比大于1.8(DNA)或2.0)RNA)。比值小于1.8或2.0时,表示有蛋白质或酚类的影响。A230表示样品中存在碳水化合物、多肽、苯酚等污染物,比较纯净的核酸A260/A230之比大于2.0。检测A320溶液的浊度和其他干扰因素。纯样品,A320一般为0。
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